Полимеразна верижна реакция и своята същност и обхват на

Полимеразна верижна реакция (PCR) - метод на молекулярната биология, което позволява да се открие в биологичен материал малки количества от дезоксирибонуклеинова киселина (ДНК), или по-скоро, някои от неговите фрагменти, и им се размножават много пъти. След това те се идентифицират визуално чрез гел електрофореза. Реакцията е разработен през 1983 г. от К. Мълис и са включени в списъка на изключителни открития през последните години.

Какви са механизми PCR

Цялата процедура се основава на способността на нуклеинови киселини за самостоятелно копие, че в този случай проведе изкуствено в лабораторията. ДНК репликация не може да започне всеки регион на молекулата, но само в области със специфична последователност от нуклеотиди - изходните фрагменти. За полимеразна верижна реакция е започнало, трябва праймер (или ДНК сонди). Това са къси фрагменти на ДНК последователности с дадена нуклеотидна последователност. Те се допълват (т.е., съответстващи) началото на ДНК проба порции.

Разбира се, да се създадат праймери, учените трябва да изучават последователност от нуклеотиди на нуклеинова киселина, която участва в процедурата. Тези ДНК сонди гарантират специфичността на реакцията и неговото започване. Полимеразна верижна реакция няма да се, ако пробата не намира най-малко една молекула на желаната ДНК. По принцип, реакцията изисква горните праймери, набор от нуклеотиди, топлоустойчива ДНК полимераза. Последното е ензим - каталитични реакции за синтез на нови молекули от нуклеинови киселини на базата на проба. Всички тези вещества, включително биологично вещество, което е необходимо да се идентифицират ДНК се смесват в реакционна смес (разтвор). Той е поставен в специален термостат, който изпълнява много бързото му отопление и охлаждане в рамките на определено време - цикъл. Те обикновено 30-50 са.

Как е тази реакция

Същността на това е, че по време на един цикъл, праймерите са свързани към части от желания DNA, след което отива удвояване от ензима. Въз основа на получените ДНК веригите синтезирани в следващите цикли повече и повече парчета от идентични молекули.

Полимеразна верижна реакция е последователно възстановени след неговите стъпки. Той се характеризира с първа удвояване на количеството на продукта по време на всеки цикъл на нагряване и охлаждане. Във втория етап на реакцията протича забавяне, тъй като ензимът е повреден и губи активност. В допълнение, изчерпани запаси от нуклеотиди и праймери. В последния етап - на платото - продуктите, вече не са се натрупват като реагенти свърши.

Когато тя се използва

Без съмнение, най-широкия заявление полимеразна верижна реакция намира в областта на медицината и науката. Той се използва в публичния и частния биология, ветеринарна медицина, фармация, а дори и екология. Докато последните се прави, за да контролира качеството на храните и обекти на околната среда. Активно се използва полимеразна верижна реакция в съдебномедицински практиката да се потвърди бащинството и идентифициране на самоличността на дадено лице. В криминалистиката, както и в палеонтологията, често този метод е единственият начин, тъй като той обикновено е на разположение за изследване на изключително малки количества ДНК. Разбира се, много широко използван метод е установено в практиката на медицината. Той имаше нужда от нея в такива области като генетика, инфекциозни и онкологични заболявания.