Серологични тестове: видове, използване

Лабораторна диагностика на почти всички инфекциозни заболявания се основава на откриването на кръв в антитела на пациента, които се произвеждат от антиген патоген, серологични методи. Те влязоха в медицинската практика в края на деветнадесети - началото на ХХ век.

Развитието на науката е помогнала да се определят антигенната структура на микроби и химични формули на техните токсини. Възможно е да се създаде не само терапевтично, но и диагностичен серум. Те се получават чрез прилагане атенюирани патогени лабораторни животни. След няколко дни на накисване кръвни зайци или мишки получават продукти, използвани за идентифициране на бактерии или техни токсини, използвайки серологични тестове.

Външният проявление на тази реакция зависи от условията на неговата формулировка и състоянието на антигени в кръвта на пациента. Ако микроби са неразтворими частици, те се утаи, лизират, имобилизиран или свързан в серума. Ако антигените са разтворими, изглежда феномена на неутрализация или утаяване.

аглутинация (БКП)

Серологичен тест за аглутинация е силно специфичен. Лесно е да се изпълнява и е съвсем ясно за бързо откриване на наличието на антигени в серума на пациента. Той се използва за определяне на Видал реакция (диагностика на коремен тиф и паратиф) и Weigl (тиф).

Тя се основава на специфично взаимодействие между човешки антитела (или аглутини) и микробни клетки (agglyutenogenami). След тяхното взаимодействие се образуват частици, които се утаяват. Това е положителен знак. За определяне на реакцията могат да се използват живи или мъртви микробни агенти, гъбички, протозои, кръвни клетки и соматични клетки.

Химическа реакция се разделя на две фази:

1. Специфични антитела съединение (В) с антигени (Ag).
2. Неспецифичното - отлагането на конгломерати AG-AT, т.е. образуването на аглутинира.

Реакция непряко аглутинация (TPHA)

Тази реакция е по-чувствителен, отколкото предишната. Той се използва за диагностика на заболявания, причинени от бактерии, вътреклетъчни паразити, протозои. Тя е толкова специфичен, че може да открие дори много ниски концентрации на антитела.

От своя състав се използва пречистена овчи червени кръвни клетки и червените кръвни клетки от човешки предварително третирани с антитела или антигени (това зависи от това лаборатория иска да намери). В някои случаи, човешки червени кръвни клетки, третирани с имуноглобулини. Серологичният отговор на еритроцитите се считат за валидни, ако утаяване него настъпили в долната част на тръбата. Положителната реакция може да се каже, когато клетките са разположени във формата на обърнато чадър, заемащи цялата дъното. Отрицателното Реакцията се отбележи, когато червените кръвни клетки се утаяват под формата на колона или бутони в центъра на дъното.

Реакционната утаяване (RP)

Серологични реакции от този тип служат за идентифициране на изключително малки частици антигени. Това може да бъде, например, протеини (или техни части), съединения с протеини с липиди или въглехидрати, част от бактериите и техните токсини.

Серумите на реакцията се получава чрез изкуствено заразяване на животни, обикновено зайци. При този метод, можете да получите абсолютно всяка необмислена серум. Постановка серологично утаяване подобен механизъм на действие на аглутинация. Антителата, съдържащи се в серума се свързват с антигени в колоиден разтвор , за да образуват големи протеинови молекули, които се отлагат на дъното на тръбата или върху субстрата (гел). Този метод се счита за високо специфичен и може да открие дори следи от веществото.

Използва се за диагностициране на чума, туларемия, антракс, менингит и други заболявания. Също така участва в съдебния преглед.

тест гел утаяване

Серологични тестове могат да се извършват не само в течна среда, но в агарозен гел. Това се нарича разсеяна метод утаяване. С него се проучи състава на сложни антигенни смеси. Този метод се основава на хемотаксиса на антигени до антитела, и обратно. Гелът се движат един към друг с различни скорости и среща за образуване на утаяване линии. Всеки ред - един набор от K-AT.

Неутрализация екзотоксин антитоксин (RN)

Антитоксично серум може да неутрализира екзотоксин които произвеждат микроорганизми. Въз основа на тези данни и серологични тестове. Микробиология използва този метод за титруването на серуми, токсини и токсоиди, както и тяхната терапевтична активност. Силата на неутрализацията на токсина се определя от конвенционални единици - AE.

Освен това, поради тази реакция може да се определи вида или видовете, принадлежащи екзотоксин. Той се използва за диагностициране на тетанус, дифтерия, ботулизъм. Изследването може да се извърши "на стъклото", и по-гел.

лизис реакция (RL)

Имунната серум, който влиза в тялото на пациента, има, освен неговата основна функция на пасивен имунитет, дори и литични свойства. Той е способен на разтваряне микробни агенти, клетъчни и чужди елементи вирусни влезе в тялото на пациента. В зависимост от специфичността на антителата, включени в серумните изолира bactericidin, цитолизини, spirohetoliziny, хемолизини и други.

Тези специфични антитела се наричат "допълнение". Той се намира в почти всички телесни течности, има комплекс протеинова структура и е много чувствителен към повишаване на температурата, разклаща се, киселини и пряка слънчева светлина. Но в сухо състояние е в състояние да запазят своите литични свойства на до шест месеца.

Има някои видове серологични тестове от този тип:

- bacteriolysis;

- хемолиза.

Bacteriolysis се извършва с помощта на кръвен серум на пациента и специфичен имунен серум с живи микроби. Ако и след това изследователят вижда разрушаване на бактериите, и отговорът ще се счита за достатъчен брой положително допълнение присъства в кръвта.

втори отговор кръв серологично е, че суспензията от еритроцити лекувания пациент серум, съдържащ хемолизини, които се активират само при наличието на определена комплимент. Ако има едно, а след това в лабораторията гледане на разпадането на червените кръвни клетки. Тази реакция е широко използван в съвременната медицина за определяне на титъра на комплемента (т.е., най-малката му количество провокира лизиране на червените кръвни клетки) в кръвния серум и за производството на анализ на свързване на комплемента. Беше по този начин проведено серологично реакция за сифилис - Wasserman.

свързване на комплемента (РСК)

Тази реакция се използва за откриване на серумни антитела на пациента на инфекциозен агент, както и за идентифициране на създателя на своята антигенна структура.

До този момент сме описали прост серологични тестове. RAC счита трудно реакция, тъй като взаимодейства не два, а три елемента: антитяло, антиген и допълва. Същността се състои в това, че взаимодействието между антитялото и антигена се среща само в присъствието на протеини комплимент които се адсорбират върху повърхността на образувания комплекс К-АТ.

Самите антигени след добавяне на допълнение, при спазване на съществените промени, които показват качеството на реакцията. Това може да бъде лиза, хемолиза, обездвижване, бактерицидно или бактериостатично действие.

Самата реакцията протича в две фази:

1. Образуването на антитяло-антиген, който не е визуално забележим изследовател.
2. Промяна на антигена под действието на комплемента. Тази фаза обикновено могат да бъдат проследени с невъоръжено око. Ако визуален отговор не се вижда, а след това използвайте допълнителна система от показатели, който позволява да се открият промени.

индикатор система

Тази реакция се основава на свързването на комплемента. час на епруветки след определяне RSK прибавят пречистени овчи еритроцити и серум хемолитична не съдържащ комплемент. Ако тръбата се оставя несвързания допълнение, тя ще се присъедини към комплекс N-АТ образуван между овце кръвни клетки и хемолизин, и да предизвика тяхното разтваряне. Това би означавало, че DGC е отрицателна. Ако червените кръвни клетки остават непокътнати, след това, съответно, реакцията е положителен.

хемаглутинацията (RHA)

Има два коренно различни хемаглутинационната. Един от тях - серологични, тя се използва за определяне на кръвни групи. В този случай еритроцити взаимодействат с антитела.

И втората реакция не е свързано с серологични, тъй като червени кръвни клетки реагират с хемаглутинин, произведени от вируси. Тъй като всеки възбудител действа само върху конкретни еритроцити (пиле, овца, маймуна), можем да предположим, тази реакция тясно специфични.

Ясно положителен или отрицателен отговор, е възможно за местоположението на кръвните клетки в долната част на тръбата. Ако фигура прилича на обърната чадър, след това желания вирус присъства в кръвта на пациента. И ако всички червени кръвни клетки, образувани като хвърлите монета колони, няма неизвестни патогени.

Реакция на инхибиране хемаглутинацията (HAI)

Това силно специфична реакция, която позволява да се установи форма, вида на вируса или наличието на специфични антитела в серума на кръвта на пациента.

Същността се състои в това, че антителата се добавят към епруветката, съдържаща изпитваното вещество, предотвратява отлагането на антигени върху еритроцити, като по този начин спира хемаглутинацията. Това е качествен показател за наличието на специфични антигени в кръвта до определена желана вирус.

Реакция имунофлуоресценция (RIF)

Реакцията се основава на способността да се идентифицират комплекси с АТ-AH флуоресцентна микроскопия след лечение flyuorohromnymi багрила. Този метод е лесен за използване, не изисква изолиране на чиста култура и отнема малко време. Това е задължително условие за бързото диагностициране на инфекциозните болести.

На практика тези серологични тестове са разделени в две категории: преки и косвени.

Директен RIF произведени антиген, който предварително обработени флуоресцентен серум. И непреки е, че лекарството се първо се обработва с конвенционален diagnosticum съдържащ антитела към желания антиген и след това отново се прилага флуоресцентен суроватка, който е специфичен за протеините на комплекс К-AT и микробни клетки стават видими чрез микроскопия.